HADA

货号：ARL0030

HADA为细菌细胞壁组分D-丙氨酸的蓝色荧光类似物。它在低浓度下不影响细胞生长，适用于对在细菌中对细胞壁肽聚糖进行活细胞标记，以便追踪细胞生长、分裂等重要生物过程的活性。

基本信息

CAS号： 2253733-10-5

分子式： C13H12N2O6.HCl

分子量： 328.7g/mol

英文全称：3-[[(7-Hydroxy-2-oxo-2H-1-benzopyran-3-yl)carbonyl]amino]-D-alanine hydrocholoride

分子结构图及荧光光谱特性：

存储液配制及保存方法

l   HADA难溶于水。可将HADA干粉溶于DMSO至100 mM，然后避光保存。即便在DMSO中，高浓度HADA也为悬浊液，因此取用前需混匀。

l   HADA干粉可在4 °C或-20°C条件下长期避光保存。HADA溶液应置于-20°C避光保存。

细胞壁标记方法

1. 向细菌培养液中加入0.2 - 2 mM HADA的培养基中培养细胞。注意不同种类的细菌以及处于不同生长状态的细菌被标记时所需的最适HADA浓度不同，需要通过预实验探索。

2. 培养一定时间后，用不含HADA的溶液或培养基将细胞洗涤1-3次，以除净细胞溶液中的HADA。

3.在荧光显微镜下观察细胞壁被HADA标记的效果。HADA激发光波长为405 nm，发射光波长为450 nm，因而可在蓝色荧光通道下进行观察。如果视野中有蓝色背景荧光信号，说明在前一步骤中未将溶液中的HADA除净，需要进一步洗涤。

HADA使用范例

图：用HADA对几种蓝细菌（蓝藻）细胞进行标记（图片来源于参考文献2）。

参考文献

1.         Kuru E., Hughes H.V., Brown P.J., Hall E., Tekkam S., Cava F., de Pedro M.A., Brun Y.V., and VanNieuwenhze M.S. (2012) in Situ probing of newly synthesized peptidoglycan in live bacteria with fluorescent D-amino acids. Angew Chem Int Ed Engl 51: 12519-12523.

2.         Zhang J.Y., Lin G.M., Xing W.Y., and Zhang C.C. (2018) Diversity of growth patterns probed in live cyanobacterial cells using a fluorescent analog of a peptidoglycan precursor. Front Microbiol 9: 791.

*本试剂仅供实验室研究使用