关键词:抗体制备抗体标记重组蛋白表达

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红细胞裂解液


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产品品牌:Frdbio 产品货号:WBR0113
保存温度:-20°C 有效日期:12个月
英文名称:Red Blood Cell Lysis Buffer
规      格: 100 ml
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1.包装清单:

产品编号

产品名称

规格

WBR0113

红细胞裂解液

100 ml

2.保存条件:本产品4保存,一年有效;室温保存, 3个月有效。

3.产品简介:

我们生产的红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer),经过优化配方,用于裂解小鼠脾脏等造血组织或者人外周血中悬浮细胞中的红细胞。此溶液中主要有效成分为氯化铵。使在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其它有细胞核的细胞。小鼠胸腺和淋巴结细胞不需要使用此裂解液。本裂解液经过无菌过滤,处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。

4.使用说明:

A.对于组织细胞样品:

1)        新鲜组织经过消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,收集小鼠脾细胞制备单细胞悬浮液。

2)        4°C 400-500 g离心弃上清取沉淀。

3)        加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,在冰上裂解4-5 min,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。例如细胞沉淀的体积为1 ml,则加入3-5 ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4°C操作均可。

4)        4°C 400-500 g离心5 min,弃红色上清。

5)        如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤3和步骤4一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

6)        加入适量PBSHBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀洗涤1-2次,4°C400-500 g离心2-3 min,弃上清。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。

7)        根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行细胞计数,调节密度,进行下一步染色。

B.对于血液样品:

1)        取新鲜抗凝血,4°C 400-500 g离心5 min,离心弃上清。

2)        加入6-10倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,在冰上裂解4-5 min,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。例如细胞沉淀的体积为1 ml,则加入6-10 ml的红细胞裂解液。

3)        接下来的步骤与A中(4-7)相同。

5.注意事项:

1)        对于微量或少量的血液样品,可以在第一步中不进行离心弃上清的操作,直接在第二步中加入10倍血液体积的红细胞裂解液,并在室温或4裂解4-5 min

2)        对于鼠的血液,裂解4-5 min已经足够。

3)        对于人的外周血,宜延长裂解时间至10 min,但通常不宜超过15 min,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。后续步骤相同。

*本试剂仅供实验室研究使用


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