关键词:抗体制备抗体标记重组蛋白表达

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抗体磁珠标记


磁珠标记抗体用途:

用超级顺磁性的 MACS MicroBeads (MACS微型磁珠)特异性地标记可以用于磁珠免疫实验免疫磁珠(ImpetiCbead,IMB简称磁珠)。标记好的磁性抗体,通过一个放在强而稳定磁场中可以分析细胞,分选柱里的基质造成一个高梯度磁场。被磁性标记的细胞滞留在柱里而未被标记的细胞则流出。当分选柱移出磁场后,滞留柱内的磁性标记细胞就可以被洗脱出来,这样就完全可以获得标记和未标记的两个细胞组份。  

超顺磁性的MACS MicroBeads 的体积很小,其直径约为50nm,体积约小于真核细胞的一百万份之一,可与病毒的大小相比。

磁珠标记基本步骤:

常用的磁珠为氨基磁珠和羧基磁珠,常用的标记偶联试剂为EDC/NHS

1.     磁珠活化:将纳米磁珠悬浮在10mM (pH5.5),室温震荡活化30min,洗掉残余活化试剂;

2.     抗体偶联:按照25ug/mg Beads偶联抗体,偶联缓冲液为10mM PBSpH 8.0),室温2小时;

3.     封闭:用终浓度为1%BSA封闭45 min,亦可以用如乙醇胺或者其他带氨基的封闭试剂;



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