关键词:抗体制备抗体标记重组蛋白表达

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DB3.1感受态细胞


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产品品牌:Frdbio 产品货号:MCC1510
保存温度:-80 有效日期:0个月
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DB3.1感受态细胞

1.包装清单:

产品编号

产品名称

规格

MCC1510

DB3.1感受态细胞

100μl*10

2.保存条件:-80℃。

3.产品简介:

本产品是采用大肠杆菌DB3.1菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,适用于构建或扩繁含有ccdB基因的质粒载体。

基因型:F- gyrA462 endA1 glnV44 (sr1-recA)mcrBmrrhsdS20(rB-,mB-)ara14galK2lacY1proA2rpsL20(Smr)xyl5 Δleu mtl1

特点:1. DB3.1菌株含有 gyrA462 基因,有对ccdB 毒性基因的抗性,特别适用于构建或扩繁含有 ccdB 基因的质粒载体。具链霉素抗性。pUC19检测,转化效率可达108 cfu/μl DNA

4使用说明:

1 100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30min
3
42℃热击45sec,然后快速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3min,该过程不要摇动离心管。
4
.每个离心管中加入450 μl无菌的SOCLB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床, 150 rpm振荡培养4560min使菌体复苏。
5
根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOCLB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养, 37℃培养12~16h

5注意事项:

1. 刚化冻的细胞转化效率最高,避免反复化冻。

2. 整个动作要轻柔。

*本试剂仅供实验室研究使用


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