OverExpress C43(DE3)感受态细胞

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1.产品简介：

本产品是采用大肠杆菌OverExpress C43(DE3)感受态细胞菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞。OverExpress C43(DE3) 菌株具有很强的表达毒性蛋白和疏水性蛋白的能力，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。

基因型：F–ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)

特点：1．OverExpress C41(DE3)、OverExpress C41(DE3)均起源于 BL21(DE3) ，可以高效表达毒性蛋白或疏水性蛋白。OverExpress C41(DE3)跟BL21(DE3)的区别在于其基因组含有至少一个未知突变，这个未知突变使其获得了高效表达毒性蛋白 (1-5)的能力，此突变位点参与大肠杆菌表达毒性蛋白时的细胞死亡途径。2．OverExpress C43(DE3)是通过筛选OverExpress C41(DE3)对另一个不同毒性蛋白的抗性菌株获得。所以OverExpress C43(DE3) 菌株与 BL21(DE3)相比拥有至少两个未知突变，正是这两个未知突变使其获得了更广泛的表达毒性蛋白或疏水性蛋白的能力。pUC19质粒检测，转化效率可达10⁸cfu/μg DNA。

2.使用说明：

1．取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30min。

3．42℃热击45sec，然后快速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min，该过程不要摇动离心管。

4．每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床， 150 rpm振荡培养45～60min使菌体复苏。

5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12~16h。

3.注意事项：

1．刚化冻的细胞转化效率最高，避免反复化冻。

2．质粒质量和浓度等的差异会使转化效率有所下降。

*本试剂仅供实验室研究使用