关键词:抗体制备抗体标记重组蛋白表达

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XL2-Blue感受态细胞


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产品品牌:Frdbio 产品货号:MCC0210
保存温度:-80℃ 有效日期:0个月
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XL2-Blue感受态细胞

产品编号

产品名称

规格

MCC0210

XL2-Blue感受态细胞

100μl*10

保存条件:-80

1.产品简介:

本产品是采用大肠杆菌XL2-Blue菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,适用于大质粒DNA和重组产物的转化,降低片段大小的偏爱性,多用于文库构建。

基因型:TetRΔ(mcrA)183 Hte[F{proAB lacIq lacZM15Tn10(TetR)AmyCamR}](mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44thi-1 recA1 gyrA96 relA1

特点:1XL2-Blue菌株来源于XL1-Blue菌株,为HTE基因型。Hte使得XL2-Blue适用于大质粒DNA和重组产物的转化,降低片段大小的偏爱性,多用于文库构建,已成功应用于40kd质粒的构建。2recA1endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。3hsdSMR突变导致EcoK核酸内切酶系统缺失,增强了外源DNA的稳定性和提取质量。4lacZ&Delta;M15 的存在使XL2-Blue菌株可用于蓝、白斑筛选。此菌株具有四环素和氯霉素抗性。pUC19质粒检测,转化效率可达108 cfu/μg DNA

2.使用说明:

1.取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30min
3
42℃热击45sec,然后快速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3min,该过程不要摇动离心管。
4
.每个离心管中加入450 μl无菌的SOCLB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150 rpm振荡培养4560min使菌体复苏。
5
.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOCLB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12~16h

3.注意事项:

1.刚化冻的细胞转化效率最高,避免反复化冻。

2.整个动作要轻柔。

*本试剂仅供实验室研究使用


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