Stbl3感受态细胞

保存条件：-80℃。

1.产品简介：

本产品是采用大肠杆菌Stbl3菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，是慢病毒载体系统推荐使用的菌株。

基因型：F- mcrB mrr hsdS20(rB-, mB-) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR) xyl-5λ-leu mtl-1 endA1+

特点：1．Stbl3来源于HB101 E. coli strain，可有效抑制长片段末端重复区的重组，降低低错误重组的概率。2．基因组含有重组酶 recA13 突变，可有效抑制长片段末端重复区的重组，降低错误重组的概率。3．菌株不含核酸酶endA1突变，体内核酸酶含量较高，提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液。菌株具有链霉素抗性，不可用于蓝、白斑筛选。pUC19质粒检测，转化效率可达10⁸ cfu/μlDNA。

2.使用说明：

1．取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30min。
3．42℃热击45sec，然后快速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min，该过程不要摇动离心管。
4．每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床， 150 rpm振荡培养45～60min使菌体复苏。
5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养 37℃培养12~16h。

3.注意事项：

1．刚化冻的细胞转化效率最高，避免反复化冻。

2．整个动作要轻柔。

*本试剂仅供实验室研究使用